如何确保固相多肽合成（SPPS）中的肽纯度和产量

2023年03月17日 13:21:21 人气: 445 来源: 岐昱实业（上海）有限公司

01/

如何测定肽纯度

02/

不同标准下肽纯度的应用

2.1

合成不同纯度肽的应用指南

2.1.1

低纯度（>50%）：该水平适用于先导化合物的高通量筛选。如果您正在研究免疫应答，除去特定的污染物，>70%可以用于抗原制备。

2.1.3

高浓度（>90%）：该水平适用于定量生物测定、定量体外受体-配体相互作用研究、配体结合的生物活性研究、定量阻断和竞争性抑制试验、定量磷酸化和蛋白水解研究、电泳标记和色谱标准分析。

03/

优化合成以达到所需浓度

3.1

合成前的关键优化步骤

3.1.1

序列分析：例如使用软件在合成之前进行合成预测，以确定在整个合成过程中是否存在合成难度很大的区域。

3.2

固相多肽合成（SPPS）过程中关键步骤

3.2.1

树脂选择：SPPS通常在与1%二乙烯基苯（DVB）交联的聚苯乙烯上进行。替代品包括聚乙二醇（PEG）衍生物，树脂的选择会影响合成成功率和粗品的纯度。连接到柱上的连接物提供生长肽和固相载体之间的可逆连接，并确定最终产物的性质和可使用的化学性质。接头的选择决定了最终产物中的C端官能团。

3.2.3

反应温度：提高温度可能会加快合成并提高纯度，但并不总是如此。需要注意的是，基于微波的加热只是加热，微波本身对合成没有特殊影响。

3.2.5

双重耦合：预测软件确定的困难耦合可以通过双重耦合、延长耦合时间或添加更多等效物来处理。

3.2.7

封端：这样做是为了在偶联反应后阻断任何未反应的氨基，或使完整肽的N-末端乙酰化。它对于在合成困难或长肽期间最小化缺失产物和辅助纯化过程是有很用的。

04/

选择一种能够快速合成高纯度肽的多肽合成仪

4.1

用于筛选方法和试剂的平行反应容器

正如我们所看到的，优化可以涉及查看大量的变量，并行运行不同试剂组合的能力将大大加快优化过程。

4.3

温度控制

提高温度可以提高某些序列的纯度。能够同时测试不同温度对提高生产率能力的影响。

4.5

稀有单体无需单次注射

特殊化学中使用的许多单体和试剂可能昂贵或珍贵，因此一些合成剂可从任何氨基酸/单体瓶位置提供免“单次注射”添加，以确保不会浪费任何东西。

全年征稿/资讯合作 联系邮箱：ybzhan@qq.com

版权与免责声明: 1、凡本网注明"来源：仪表网"的所有作品，版权均属于仪表网，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明"来源：仪表网"。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。; 2、本网转载并注明自其它来源的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品来源，并自负版权等法律责任。; 3、如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。; 4、合作、投稿、转载授权等相关事宜，请联系本网。

企业推荐

产品推荐

企业新闻